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北太平洋鱿鱼缠卵腺抗氧化酶解寡肽的制备
作者: 刘倩茹 柏圣达 赵国雨 徐云峰 杨最素
关键词: 北太平洋鱿鱼(Todarodespacificus) 缠卵腺 抗氧化 寡肽 HPLC G-25
摘要:为探讨北太平洋鱿鱼(Todarodes pacificus)缠卵腺酶解寡肽的制备和抗氧化活性,以北太平洋鱿鱼缠卵腺为原料,选择碱性蛋白酶进行酶解,以水解度和DPPH自由基清除率为指标,经单因素和正交试验方法获得最佳酶解条件,超滤得到不同分子段多肽,通过测定还原能力、DPPH清除率、Fe2+螯合能力、OH自由基清除率、超氧阴离子清除率评价不同分子量酶解多肽的抗氧化性,得出最佳分子段;采用琼脂糖凝胶G-25对最佳分子段进行分离,检测各峰对DPPH清除能力,得出最佳峰段后经HPLC进一步分离获得单一组分,由氨基酸测序仪进行N端降解测序得出目标肽序列.结果表明,碱性蛋白酶的酶解条件为温度50℃、酶解时间7 h、加酶量3500 U/g、pH 9.0、料液比1:6.经超滤得到的3~5 ku分子段抗氧化活性最强,经琼脂糖凝胶G-25分离得到3个峰,其中峰Ⅰ组分对DPPH清除率最好,当浓度为0.5 mg/mL时其DPPH的清除率为61.87%.经HPLC纯化得到单一峰,氨基酸序列测定为Ala-Tyr-Ala-Ser-Ser,相对分子质量为497.50.北太平洋鱿鱼缠卵腺酶解寡肽有较好的抗氧化活性.
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